Описание
Набор для определения активности аланин-аминотрансферазы (АЛТ/ГПТ)
Артикул #
E-BC-K235-M
Прибор для определения
Микропланшетный ридер (500-520 нм)
Метод определения
Колориметрический метод
Подробная информация о продукте
Свойства
Синонимы
АЛТ, ГПТ, глутаминопировиноградная трансаминаза
Тип образца
Сыворотка, плазма, ткани животных, клетки, супернатант клеточной культуры
Чувствительность
0,75 МЕ/л
Диапазон определения
0,75-72,3 МЕ/л
Метод определения
Колориметрический метод
Тип анализа
Активность фермента
Время анализа
80 мин
Точность
Средний межаналитический коэффициент вариации: 9% | Средний внутрилабораторный коэффициент вариации: 5,300%
Необходимые дополнительные приборы:
Микропипетка, вихревой миксер, инкубатор, многоканальная пипетка
Необходимые другие реагенты:
Ферментный раствор (0,9% NaCl), фосфатно-солевой буфер (0,01 М, pH 7,4)
Хранение:
2-8℃
Срок годности:
12 месяцев
Изображения:
X Zhang и др. исследуют использование H2O2 и O2 для совместной хемодинамической/голодающей терапии рака. Активность аланин-аминотрансферазы (АЛТ) в крови мышей определяли с помощью набора для определения активности АЛТ (E-BC-K235-M).
Значительных изменений активности АЛТ не наблюдалось, наночастицы LCFG не проявляли гепатотоксичности.
Разведение образца
Рекомендуется взять 2–3 образца с ожидаемой большой разницей для проведения предварительного эксперимента перед основным экспериментом и развести образец в соответствии с результатами предварительного эксперимента и диапазоном обнаружения (0,75–72,3 МЕ/л).
Рекомендуемый коэффициент разведения для различных образцов следующий (только для справки):
Тип образца
Коэффициент разведения
Сыворотка человека
1
Плазма человека
1
Сыворотка свиньи
1
Сыворотка крысы
1
Гомогенизация 10% ткани головного мозга крысы
1
Гомогенизация 10% ткани сердца крысы
1
Гомогенизация 10% ткани печени крысы
40–60
Гомогенизация 10% ткани почек крысы
1
Примечание: В качестве разбавителя используется физиологический раствор (0,9% NaCl) или PBS (0,01 М, pH 7,4).
Принцип обнаружения
АЛТ катализирует реакцию превращения аминогрупп между аланином и α-кетоглутаровой кислотой с образованием пировиноградной и глутаминовой кислот при pH 7,4 и 37℃. Затем добавляется фенилгидразин для образования фенилгидразона с пировиноградной кислотой. Фенилгидразон имеет красновато-коричневый цвет в щелочных условиях. Активность АЛТ можно рассчитать, измерив значения оптической плотности при 510 нм.
Состав набора и условия хранения
Наименование
Компонент
Размер 1 (48 шт.)
Размер 2 (96 шт.)
Хранение
Реагент 1
Буферный раствор
0,5 мл × 1 флакон
0,5 мл × 1 флакон
2-8℃, 12 месяцев
Реагент 2
2 ммоль/л натрия
Пируват
0,5 мл × 1 флакон
0,5 мл × 1 флакон
2-8℃, 12 месяцев
Реагент 3
Раствор субстрата
2,5 мл × 1 флакон
5 мл × 1 флакон
2-8℃, 12 месяцев
Реагент 4
Хромогенный агент
2,5 мл × 1 флакон
5 мл × 1 флакон
2-8°C, 12 месяцев, в тени
Реагент 5
Щелочь Реактив
2,5 мл × 1 флакон
5 мл × 1 флакон
2-8℃, 12 месяцев
Микропланшет
96 лунок
Не требуется
Упаковочная машина для планшетов
2 шт.
Примечание: Реактивы необходимо хранить строго в соответствии с условиями хранения, указанными в таблице выше. Реактивы из разных наборов нельзя смешивать друг с другом. Для небольшого объема реактивов перед использованием необходимо центрифугировать, чтобы получить достаточное количество реактивов.
Технические данные:
Параметры:
Внутрилабораторная точность
Для определения точности внутри анализа были проанализированы три образца сыворотки крови человека в 20 повторах. (CV = Коэффициент вариации)
Параметры
Образец 1
Образец 2
Образец 3
Среднее значение (МЕ/л)
3,50
26,50
52,60
%CV 5,7
5,2
5,0
Межлабораторная точность
Три образца сыворотки крови человека были проанализированы 17 раз в двух повторах тремя операторами для определения точности между анализами.
Параметры
Образец 1
Образец 2
Образец 3
Среднее значение (МЕ/л)
3,50
26,50
52,60
%CV 8,4
9,2
9,4
Чувствительность
Аналитическая чувствительность анализа составляет 0,75 МЕ/л. Она была определена путем добавления двух стандартных отклонений к среднему значению оптической плотности, полученному при 20-кратном анализе нулевого стандарта, и вычисления соответствующей концентрации.
Стандартная кривая
Поскольку значение оптической плотности (OD) стандартной кривой может варьироваться в зависимости от условий фактического проведения анализа (например, оператора, техники пипетирования или влияния температуры), стандартная кривая и данные приведены ниже только для справки:
Единица Кармен
0
28
57
97
150
200
Средняя OD
0,247
0,324
0,384
0,436
0,489
0,537
Абсолютная OD
0
0,078
0,137
0,190
0,242
0,290
При наличии дополнительных параметров, указывайте их в комментарии к заказу: 500 анализов 96 тестов 48 тестов
