Описание
Набор для колориметрического анализа белка BCA
Артикул #
E-BC-K318-M
Прибор для определения
Микропланшетный ридер (540-590 нм, оптимальная длина волны: 562 нм)
Метод определения
Колориметрический метод
Подробная информация о продукте
Свойства
Синонимы
TP
Тип образца
Сыворотка, плазма, супернатант клеточной культуры, ткань, клетки
Чувствительность
0,0165 мг/мл
Диапазон определения
0,0165-1 мг/мл
Метод определения
Колориметрический метод
Тип анализа
Количественный
Время анализа
40 мин
Точность
Средний межаналитический коэффициент вариации: 4,500% | Средний внутрилабораторный коэффициент вариации: 2,200%
Необходимое дополнительное оборудование:
Вихревой смеситель, микропипетка, инкубатор
Необходимые дополнительные реагенты:
Физиораствор (0,9% NaCl), фосфатно-солевой буфер (PBS) (0,01 М, pH 7,4)
Хранение:
При комнатной температуре
Срок годности:
12 месяцев
Разведение образца:
Рекомендуется взять 2–3 образца с ожидаемой большой разницей для проведения предварительного эксперимента перед основным экспериментом и развести образец в соответствии с результатами предварительного эксперимента и диапазоном обнаружения (0,0165–1 мг/мл).
Рекомендуемый коэффициент разбавления для различных образцов следующий (только для справки):
Тип образца
Коэффициент разбавления
10% гомогенизация ткани головного мозга мыши
8-12
10% гомогенизация ткани почек мыши
8-12
Сыворотка крови человека
100-200
10% гомогенизация ткани печени крысы
15-20
10% гомогенизация ткани сердца мыши
8-12
Сыворотка крови крысы
100-200
Примечание: В качестве разбавителя используется физиологический раствор (0,9% NaCl) или фосфатно-солевой буфер (0,01 М, pH 7,4).
Принцип обнаружения
Ионы Cu2+ могут восстанавливаться до Cu+ белками в щелочной среде. Ионы Cu+ могут связываться с реагентом BCA и образовывать пурпурный комплекс, пик поглощения которого находится на уровне 562 нм. Значение оптической плотности пропорционально концентрации белка. Следовательно, концентрацию белка можно рассчитать по значению оптической плотности.
Состав набора и условия хранения
Наименование
Компонент
Размер 1 (96 T)
Размер 2
(500 анализов)
Хранение
Реагент 1
Реагент BCA
25 мл × 1 флакон
50 мл × 2 флакона
При комнатной температуре, 12 месяцев
Реагент 2
Раствор соли меди
0,5 мл × 1 флакон
3 мл × 1 флакон
При комнатной температуре, 12 месяцев
Реагент 3
Стандарт
1 мг × 1 флакон
1 мг × 5 флаконов
При комнатной температуре, 12 месяцев
Реагент 4
Стандартный разбавитель
15 мл × 1 флакон
30 мл × 1 флакон
При комнатной температуре, 12 месяцев
Микропланшет
96 лунок
Не требуется
Упаковочная машина для планшетов
2 шт.
Примечание: Реагенты необходимо хранить строго в соответствии с условиями хранения, указанными в таблице выше. Реагенты из разных наборов нельзя смешивать друг с другом. Для получения небольшого объема реагентов, пожалуйста, центрифугируйте их перед использованием, чтобы не получить слишком большое количество реагентов.
Технические данные:
Параметры:
Внутрилабораторная точность
Три образца сыворотки крови человека были проанализированы в 20 повторах для определения точности внутри анализа. (CV = коэффициент вариации)
Параметры
Образец 1
Образец 2
Образец 3
Среднее значение (мг/мл)
0,08
0,28
0,65
%CV 2,5
2,3
1,8
Межлабораторная точность
Три образца сыворотки крови человека были проанализированы 17 раз в двух повторах тремя операторами для определения точности между анализами.
Параметры
Образец 1
Образец 2
Образец 3
Среднее значение (мг/мл)
0,08
0,28
0,65
%CV 4,2
4,5
4,8
Восстановление
Возьмите три образца с высокой, средней и низкой концентрацией и протестируйте образцы каждой концентрации 6 раз параллельно, чтобы получить средний коэффициент восстановления 100%.
Параметры
Стандарт 1
Стандарт 2
Стандарт 3
Ожидаемая концентрация (мг/мл)
0,25
0,45
0,85
Наблюдаемая концентрация (мг/мл)
0,3
0,4
0,9
Коэффициент восстановления (%)
101
99
100
Чувствительность
Аналитическая чувствительность анализа составляет 0,0165 мг/мл. Это было определено путем добавления двух стандартных отклонений к среднему значению оптической плотности. Получено при 20-кратном измерении нулевого стандарта и вычислении соответствующей концентрации.
Стандартная кривая
Поскольку значение оптической плотности (OD) стандартной кривой может варьироваться в зависимости от условий фактического проведения анализа (например, оператора, техники пипетирования или влияния температуры), стандартная кривая и данные приведены ниже только для справки:
Концентрация
(мг/мл)
0
0,2
0,3
0,4
0,6
0,7
0,9
1
Средняя OD
0,081
0,308
0,395
0,494
0,666
0,761
0,906
0,984
Абсолютная OD 0
0,227
0,314
0,413
0,585
0,680
0,825
0,903
При наличии дополнительных параметров, указывайте их в комментарии к заказу: 500 анализов 96 тестов
