Описание
Одноэтапный набор для определения апоптоза клеток методом TUNEL (зеленый, Elab Fluor® 488)
Введение
Одноэтапный набор для определения апоптоза клеток методом TUNEL от Elabscience® использует высокочувствительный, быстрый и простой метод. Этот набор подходит для определения апоптоза in situ в образцах тканей (парафиновые срезы и замороженные срезы) и клетках (препараты и мазки). Результаты можно наблюдать непосредственно под флуоресцентным микроскопом.
Подробная информация о продукте
Свойства
Применение
Фрагментация ДНК
Метод обнаружения
Флуорометрический метод
Тип образца
Парафиновый срез, замороженный срез, клеточный препарат
Время анализа
3 часа
Прибор для обнаружения
Флуоресцентный микроскоп
Тип красителя
Elab Fluor® 488
Ex/Em (нм)
495/519
Набор каналов
FITC
Набор фильтров
FITC
Необходимые другие реагенты
4% параформальдегид (E-IR-R113), 0,2% Triton X-100 (E-IR-R122), PBS (E-IR-R187), дистиллированная вода, раствор для монтирования с антифлуоресцентным гасителем (E-IR-R119), ксилол, этанол
Хранение
-20°C, в тени
Доставка
Пакет со льдом
Срок годности
12 месяцев
Обнаружение Принцип действия
При апоптозе клеток активируются специфические ДНК-эндонуклеазы, разрезающие геномную ДНК между нуклеосомами. ДНК апоптотических клеток расщепляется на мультимеры фрагментов размером 180–200 п.н., что соответствует размеру олигонуклеосом. Поэтому ДНК апоптотических клеток обычно мигрирует на агарозном геле в виде лестницы фрагментов размером 180–200 п.н. Открытая 3′-ОН-группа разорванной ДНК может быть катализирована терминальной дезоксинуклеотидилтрансферазой (TdT) с помощью меченного флуоресцеином dUTP, что может быть обнаружено с помощью флуоресцентного микроскопа.
Хранение
Хранить при -20°C в течение 12 месяцев. Раствор для мечения и реагент DAPI (25 мкг/мл) следует хранить в темноте.
Примечания
Этот набор предназначен только для исследовательских целей.
Пожалуйста, соблюдайте меры предосторожности и следуйте инструкциям по работе с лабораторными реагентами.
Промывка должна быть достаточно тщательной, иначе это повлияет на активность ферментов (таких как ДНКаза I и фермент TdT) в последующих экспериментальных операциях. После промывки предметных стекол фосфатно-солевым буфером (PBS) аккуратно промокните жидкость вокруг образцов впитывающей бумагой.
Поддерживайте влажность образца во время эксперимента, чтобы предотвратить сбой эксперимента из-за сухости предметных стекол.
Избегайте повторного замораживания и оттаивания раствора для мечения и фермента TdT. Перемешивание с помощью вихревого перемешивания не рекомендуется.
Рекомендованные в данном руководстве условия являются универсальными. Пользователи могут оптимизировать время обработки образца, концентрацию реагентов и другие условия в зависимости от типа образца и результатов предварительного эксперимента, выбирая наиболее подходящие экспериментальные условия.
При наличии дополнительных параметров, указывайте их в комментарии к заказу: 100 анализов 50 анализов 20 анализов
